汉代墓室壁画的题材包罗万象，其涵盖内容十分丰富，反映了当时人们对于“灵魂说”的信仰，对道家、儒家等思想，阴阳五行以及对现实世界的肯定。总的来说，汉代墓室壁画的内容，基本上囊括了我国古代早期比较有影响的思想观念，但是汉代墓室内的壁画伴随着时代的变迁以及地域的不同，题材内容也有所不同。
1.宇宙天象以及各种灵种异类组合。这一类题材，主要在西汉末到东汉初，一直贯穿于墓室壁画的始终。其内容有日月星辰、各种星宿、四大神兽(青龙、白虎、朱雀、玄武)、人皇伏羲、大地之母女蜗，以及人们在神话传说中的诸神、天庭中的仙灵瑞兽、仙草等。
2.用以辟邪镇墓的神怪人物或者各种灵异。这类题材内容几乎在每个墓室壁画中都存在，有一定的变化，当时的人们认为它们是墓室和墓主人的守护者，一般是取自当时的神话传说中来自神界具有神力的灵兽，一直延续到东汉后期，镇墓辟邪的神灵象征依然存在，而且加以变换出现了虎头、重明等新的镇墓形象，但基本上以面目狰狞的神灵镇墓比较普遍。
3.对墓主人生前的生活状态、重要功绩的描述。主要有墓主人举行宴会的场面、主人场面恢弘的车马出行队伍、表现墓主人受欢迎的场面、墓主人从政的场面，包括在府衙、军帐、武库等，描绘墓主人的房屋、良田、劳作丰收等场景。